【摘要】 目的 研究增殖细胞核抗原ki67对宫颈病变的分流作用。方法 所有宫颈ASCUS病例均行薄层液基涂片检测，同时行Ki67免疫组化染色，以病理活检作为诊断为标准，预测Ki67对宫颈病变ASCUS的鉴别意义。结果 A组：909±3.11；B组：1796±4.49；C组：6543±1542；F值15618；P<005，经比较3组间差异有统计学意义。结论 Ki67免疫组化染色对ASCUS的分流具有重要参考价值，值得临床推广用用，是较为理想的筛查方法。
【关键词】 薄层液基细胞学检查；Ki67；宫颈病变
1 资料与方法
1.1 一般资料 2010年6月至2012年12月间检查宫颈TCT患者2075例，诊断为ASCUS100例，均来自郑州市第一人民医院妇科门诊及住院患者，10例为住院患者，诊断为宫颈原位癌或浸润癌5例，年龄18～65岁，平均年龄392岁，经免疫组化Ki67检测，同时行阴道镜下活检病理证实。
1.2 研究方法 分三组：所有ASCUS病例均行Ki67免疫组化染色，再行阴道镜下活检，病理科医师的协助下完成显微镜下阅片。
1.3 结果判定 细胞学诊断：液基涂片采用TBS（The Bethesda System）系统进行诊断，涂片中细胞数>5000者有评估价值。细胞学诊断为ASCUS意义不明的不典型鳞状细胞。
Ki67免疫组化阳性标准：细胞核内棕黄色颗粒达到下述标准者为Ki67阳性染色：涂片在显微镜下观察10个高倍（×400）视野，每个视野计数100个细胞，根据其中有Ki67标记核的细胞所占的百分比来评估。以阳性细胞数≥10%为阳性。
1.4 分析方法 宫颈TCT诊断为ASCUS病例，计算免疫组化Ki67阳性预测值等，以阴道镜下宫颈组织活检或术后病理组织学诊断为金标准，结果包括炎性反应性细胞、CIN I及以上病变。
1.5 统计学方法 采用110进行统计学分析，计数资料采用方差分析，率的比较采用卡方检验，对比以P值<005为差异有统计学意义。
2 结果
对100例TCT诊断为宫颈ASCUS患者行免疫组化Ki67检测后行阴道镜下活检病理分析，最终进行诊断学对比分析，评价诊断正误率。
2.1 免疫组化Ki67与组织学诊断的比较 见表1，所有ASCUS患者均行免疫组化Ki67染色后行阴道镜下多点活检，其中炎性反应性细胞改变12例（A组）120%（12/100）；CINI、CINII、CINllI83例（B组）83.0%（83/100）；宫颈鳞状细胞癌或浸润癌5例（C组），5.0%（5/100）。
3 讨论
宫颈癌占女性生殖道恶性肿瘤的首位。近年来其发病率呈年轻化趋势，宫颈病变经历从癌前病变到癌变的10余年的漫长过程，因此对于宫颈病变的早期诊断及早期治疗提供了足够的时间，尤其是早期诊断意义重大，宫颈TCT的出现明显提高了诊断的准确率及阳性率，前期研究发现通过对宫颈ASCUS的随访，约20%发展为LSIL，10%发展为HSIL[4]，因此对于宫颈病变早期准确诊断意义重大，临床上迫切需要一种生物学标志物辅助对ASCUS更进一步细化分类。
Ki67抗原是增殖细胞核抗原中较为常用的一种生物学标志物，在有丝分裂中G0期以外的细胞周期均有表达，由于其细胞周期短，脱离活体后迅速讲解，故可准确的反应细胞活性。国外学者报道，Ki67是判断CIN和宫颈癌级别的一个敏感指标，也可预测早期宫颈病变的进展情况[5]。Ki67表达在多种肿瘤中均有明显的改变，不仅对恶性肿瘤的诊断具有重要意义，而且对预测肿瘤的预后也很有价值，已有报道应用其抗体定量分析肿瘤的生长分数，肿瘤的分级、增生程度及预测肿瘤的预后[6]。
将免疫组化方法ki67与细胞学诊断相结合，尤其对于临床诊断为非典型鳞状细胞的病例有重要意义。Cheung[7]等研究表明，在60例液基宫颈细胞学涂片上检测Ki67的免疫反应性，结果表明在宫颈鳞癌和HSIL中，ki67呈现强阳性反应。认为经Thinprep处理的宫颈细胞学涂片适于免疫细胞化学研究，异常的鳞状上皮细胞及腺上皮细胞在核异型的背景下辅以ki67强阳性染色很容易识别，并能提高观察者之间的一致性和可重复性。Sahebali[8]等在147例宫颈液基细胞学涂片上行Ki67染色并探讨其与HPV感染的相关性，结果表明在HSIL组，Ki67免疫反应阳性细胞数显著高于其他组，有一部分ASCUS为绝经后萎缩上皮细胞，对这些细胞Ki67通常是阴性的，因此认为Ki67免疫细胞化学分析有助于减ASCUS的诊断，能够帮助鉴别异常增生细胞与萎缩细胞。他指出Ki67可以作为液基宫颈细胞学的一个辅助指标来诊断HSIL。本实验研究表明随着宫颈病变程度的升高ki67的表达呈上升趋势，在炎性反应性细胞与CINI之间有显著性差异；CINI与CINII之间无差异；CINII与CINIII之间有显著性差异，CINIII与鳞癌之间无显著性差异，因此本实验表明对于ASCUS，行免疫组化ki67检测，有助于HSIL和LSIL之间的区别。
总之，免疫组化ki67检测对于宫颈ASCUS的鉴别诊断其方法简单，易于操作，远期可对宫颈病变的治疗及预后提供理论依据，对于宫颈病变的规范化治疗意义重大。
参 考 文 献
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