【摘要】目的 研究急性心肌梗死后心脏出现的炎症性伤害。方法 在体结扎实验老鼠的冠状动脉对前降支复制急性心肌梗死大鼠模型以及正常状况的实验老鼠假手术进行对比。六周后，酶联免疫吸附实验测定两组实验鼠体内的血清抗肌球蛋白重链的抗体。在研究当中检测心肌的改变情况，免疫组织化学染色分析进入心肌组织T淋巴细胞的表型。结果 由于急性心肌细胞梗死的实验鼠在血清当中具有此种抗体，出现率已经达到41.7%。假性实验的大鼠都呈阴性。并且实验鼠在非梗死心肌组织当中出现血管周围炎与间质淋巴细胞的侵袭。结论 急性心肌梗死后心肌组成出现了不同的炎症。
【关键词】急性心肌梗死；免疫；抗体
【中图分类号】R542.22 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-6681.2015.01.0.02
急性心肌梗死（AMI）是一种威胁人们生命安全的常见疾病[1]，在此病发生去世后心肌组织会释放以及出现很多自身抗原，能够使得自身的免疫系统出现应答反应。为了检验急性心肌梗死能够让自身免疫反应对机体出现自我损伤的作用，我们使用在体结扎冠状动脉最前降支复制实验鼠的急性心肌梗死模拟实验，观察实验鼠的反应，研究急性心肌梗死后心室重新构建的新型体制。
1 资料与方法
1.1 急性心肌梗死实验鼠模型的复制
使用同种实验鼠，均为雄性，质量（230±15）g。3%戊巴比妥钠30 mg/kg进行腹腔麻醉，之后经过器官插管，将其接到动物人工呼吸机器，时候对于通气量进行合理的改变，保证在1.0 ml/g·min。密切注视心电图的变化。左胸前3、4两个肋骨之间进行横向的切口，进行右侧的剥离各层次的组织，能够暴露出心脏位置，之后剪开心包。在左心耳的右下缘的1 mm地方、肺动脉圆锥左缘使用无损害的缝针进行左前降支（LAD）下方心肌表层进行缝合。假性手术的实验鼠在结扎先的位置并不给予结扎，之后两组实验鼠经行胸腔的缝合。手术之后进行肌肉注射青霉素两万U，1次/d，连用3天。将实验鼠在一样的环境下饲养6周[2-3]。
1.2 抗肌球蛋白重链抗体的检验
使用有关文献说明的方式，使用酶联免疫吸附实验对实验鼠的血清进行肌球蛋白重链抗体的测定。
1.3 组织学测定
使用未检测的心肌标本将其使用10%中性缓冲甲醛液进行固定18 h。对其脱水、透明等制作标本的步骤进行。进行H-E染色后封片进行电镜下的检验。
1.4 免疫组织化学染色检验
石蜡包埋的心肌标本经过常规步骤，放置于载破片上，在60℃下0.5 h使切片粘附到载玻片上，脱蜡至3%过氧化氢将其内部的过氧化氢酶灭活，时间为10 min。冲洗后在磷酸盐缓冲液（PBS）当中浸泡5 min。将切片使用构橼酸盐实验进行恢复抗原活性的修复。在使用试剂将其血清去除多余的血清，之后将实验鼠的抗体进行稀释，比例为1：50。在4℃的温度下放置12 h后使用PBS进行三次的冲洗工作。在加入生物素化羊抗小鼠的IgG，在37℃的温度下放置
20 min，在使用PBS进行三次的冲洗工作。3-3’-二氨基联苯胺（DAB）在常温下的显色出现明显的效果后，使用自来水将其冲洗结束反应。苏木素复染细胞核30 s，将其多余的染液去除，酒精脱水后进行封片，在镜下观察。
2 结 果
2.1 心肌梗死大白鼠心肌病理以及免疫病理特征
通过眼睛我们能够观察到心肌梗塞大白鼠心脏心脏梗塞区域呈现灰白色，和非梗塞区域对比明显，心腔明显增大，一些标本带有室壁瘤生成。H-E染色组织学通过观察了解到，心肌梗塞区域大部分纤维化，并被微量甚至大量淋巴细胞沉积。在非梗塞区域的部分也伴有微量的淋巴细胞沉积，并且能够观察到血管周围炎的出现。免疫组织化学染色表示，在心肌组织内伴有CD4+与CD8+细胞沉积，CD4+T细胞具有明显的胜势[4-5]。
2.2 抗肌球蛋白重链抗体的检查率
通过观察我们能够了解到，心脏梗塞大白鼠血清抗主组织相容性复合基因抗体阳性几率是41.7%（5/12），对照组的抗主组织相容性复合基因抗体平均呈现阴性（0/10），两组的抗主组织相容性复合基因抗体的阳性概率差异有统计学意义（P<0.05）。
3 讨 论
急性心肌梗塞后坏死的心肌释放或者是显露出很多抗原，进而引发心肌免疫现象的出现。Pang H等研究人员针对于急性心肌梗塞后抗主组织相容性复合基因抗体呈现阳性的患者采取了长达半年的随访，了解到抗主组织相容性复合基因抗体呈现阳性的患者死亡的几率、室壁运动降低的程度以及室壁瘤产生的几率全部显然多于抗体阴性组织，在此声患有明急性心肌梗塞后免疫机理也许会损害到心肌部位，参加急性心肌梗塞后心室重组。此项分析首先在急性心肌梗塞大白鼠模板了解到41.7%大白鼠出现了抗主组织相容性复合基因抗体，了解到急性心肌梗塞大白鼠心肌非梗塞区域的病理现象，此病理现象已经高于免疫组织对心肌损坏结构的清理范围，并产生了反应性延伸。通过证明急性心肌梗塞之后心肌免疫具有临床意义。
Neu等相关人员经过分析，觉得在心肌肌球蛋白分子中含有很多可以被朝囊定位细胞以及胸腺依赖性淋巴细胞辨别的抗原物质，而被胸腺依赖性淋巴细胞辨别的多肽序列也许会在同一时间内产生于普通心肌细胞表层，早期心肌部分产生很多的淋巴细胞与巨噬细胞沉积，破坏心肌部位，远期心肌呈现扩大心肌病理特征。所以急性心肌梗塞后抗肌球蛋白抗体的出现，在一些意义上来讲代表着含有临床意义的细胞免疫组织系统的成立。类似这样的细胞免疫现象的临床型延伸致使普通心肌的损坏。
总而言之，此项分析首先在急性心肌梗塞大白鼠模板中了解到心肌非梗塞区域特殊的免疫现象，甚至是在大白鼠的血清之中检查到抗肌球蛋白重链抗体，AMI心脏部分出现了免疫现象。针对于这类的心肌免疫现象对心脏的损坏程度以及其的预后作用仍旧需要深入的调查和分析。
参考文献
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