材料与方法
1.1试验材料
供试菌种：葡萄灰霉病菌；葡萄果穗附生细菌13种
葡萄品种：中抗品种红地球
1.2试验方法
1.2.1附生细菌的平板对峙试验
为了简化工作量，采用了复式筛选法【2】，首先在平板上粗筛选出拮抗作用明显的菌株，然后，再进行二次平板筛选，找到最具拮抗作用的拮抗菌。
1.2.2附生细菌对病原菌孢子萌发的抑制试验【3】
将待测菌液于26℃、180r/min摇床培养3d。取葡萄灰霉病孢子悬浮液（107个孢子∕ml）10ul，加10ul待测细菌发酵液，置无菌洁净载玻片上，于培养皿内25℃保湿，8h后观察孢子萌发情况。以0.5%葡萄糖液作对照，每个处理调查200个孢子，重复3次。计算发酵液对孢子萌发的抑制率。将100%抑制孢子萌发的发酵液稀释10、100、1000倍后再测定抑制孢子萌发情况。将待测菌发酵液5000r/min离心10min，取上清液进行抑制孢子萌发试验，方法同上。
1.2.3附生细菌对灰霉病菌菌丝生长的抑制试验【4】
取灰霉病菌孢子悬浮液0.5 ml加入盛有10ml已冷却至50℃的PDA培养基中。将直径为5mm灭菌滤纸片蘸上发酵液，放入配好的培养皿中，每个培养皿放两片，25℃培养3d后测量抑菌圈直径，以无菌水作对照，重复3次。
2 结果与分析
2.1 13种附生细菌对峙试验结果
通过二次平板对峙试验，结果表明：分离得到的13种细菌中，除了B9和B13对葡萄灰霉病没有拮抗作用外，其他11种细菌对灰霉病均有拮抗作用，但不同附生细菌的抑菌力差异性显著。其中B5、B12的抑菌能力最强，达到了50%以上；而B4的抑菌能力最差，仅为16.11%；其他8种细菌的抑菌能力均在20%-50%之间。
2.2附生细菌对灰霉病菌孢子萌发的（下转第75页）抑制试验
将对葡萄灰霉病有抑制作用的11种拮抗细菌的发酵液及发酵液离心后上清液对灰霉病菌孢子的抑制试验表明（表1）：B12菌株的抑制率最高，发酵液原液及稀释10、100倍发酵液抑菌率均为100%，稀释1000倍的发酵液的抑菌率仍为95.34%；B12菌株发酵液离心后上清液的原液及稀释10倍的上清液的抑制率也均为100%，稀释1000倍上清液为93.84%。B5和B1的抑制效果次之，而B4是抑制率最低。11种拮抗菌液均因稀释倍数的增加，抑制率下降，发酵液的抑菌率高于发酵液离心后的上清液。
2.3附生细菌对灰霉病菌菌丝生长的抑制试验
通过对11种拮抗细菌对灰霉病病菌菌丝生长的抑制试验结果表明，不同附生细菌对病菌菌丝的抑制效果差异较大，其中B12的抑菌能力最强，为15.17%， B5、B10次之，而B2、B7、B4的抑菌率均为5.55%，效果不明显。
3 结论
在葡萄果穗上分离出的13种附生细菌经平板对峙试验初筛，筛选出11种对葡萄灰霉病有抑制作用的拮抗菌。
将11种具有拮抗作用的附生细菌对灰霉病菌孢子抑制试验、对灰霉病菌菌丝生长的抑制试验结果均表明，B5和B12菌株的抑制能力最强，是优势拮抗菌株，而B4和B6菌株的抑制能力最差，其它7种拮抗细菌的抑菌能力均在它们之间，波动不大。11种附生拮抗细菌的能力在不同的抑制试验中略有差异，但并不影响整体的结论，这可能是由于试验中有许多外界的条件影响和人为的误差所导致的。为进一步应用拮抗菌提供理论依据，还需进行生物学特性、主要抗菌物质性质等基础问题的研究【5】。
参考文献
[1]Janisiewcz W J.Charicaterizing the mechanism of biological control of postharvest diseases on fruits with a simple method to study competition for nutrients[J].Phytopathology，2000，90（11）：1196～1200
[2]蒋跃明，陈芳.生防菌防治荔枝采后病害的初步研究[J].果树科学，1997，14（3）：185～186
[3]范青，田世平，李永兴，等.枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）B-912对采后柑橘果实青、绿霉病的抑制效果[J].植物病理学报，2000，1（3）：343～348
[4]赵白鸽，孔建，王文夕，等.枯草芽孢杆菌B-903对苹果轮纹菌作用及其对病害的控制效果[J].植物病理学报，2000，27（3）：213～214
[5]王明祖，周华众，付艳平，等.B6-1菌对植物病原真菌的接抗性[J].中国生物防治，1996，12（1）：20～23
作者简介：
崔欣（1982.11-），女，吉林人，硕士研究生，吉林农业大学发展学院助教，主要从事园林植物配置的研究
李伟（1983.6-），男，吉林人，硕士研究生，长春经济技术开发区风景园林有限责任公司工程师，主要从事城市绿地规划园林植物配置的研究
